微生物实验报告

时间:2024-09-28 10:00:41 实验报告 我要投稿

微生物实验报告(优选)

  在当下社会,报告的使用频率呈上升趋势,我们在写报告的时候要注意逻辑的合理性。一起来参考报告是怎么写的吧,以下是小编收集整理的微生物实验报告,欢迎大家分享。

微生物实验报告(优选)

  一、实验题目:

  微生物的革兰氏染色

  二、实验目的:

  1、学习并初步掌握革兰氏染色法;

  2、了解革兰氏染色的原理;

  3、巩固显微镜的使用。

  三、实验原理:

  革兰氏染色是1884年丹麦病理学家christain gram氏创立的,是细菌学中最重要的鉴别染色法。染色步骤分为四个部分:

  1、初染:加入碱性染料结晶紫固定细菌图片;

  2、媒染:加入碘液,碘与结晶紫形成一种不溶于水的复合物;

  3、脱色:利用有机溶剂乙醇或丙酮进行脱色;

  g-和g+细胞壁的比较:

  1、阳性(g+)菌细胞壁特点:细胞壁厚,只有一层,主要由肽聚糖构成,肽聚糖含量高,结构紧密,脂类含量低。当乙醇脱色时,细胞壁肽聚糖层孔径变小,通透性降低,结晶紫和碘的复合物被保留在细胞壁内,复染后仍显紫色(如芽孢杆菌)。

  2、阴性(g-)菌细胞壁特点:细胞壁薄,由两层构成,内壁层和外壁层,细胞壁中脂类中脂类物质含量较高,肽聚糖含量较低,网状结构交联程度低,乙醇脱色时溶解了脂类物质,通透性增强,结晶紫与碘的复合物易被乙醇抽提出来,因此,革兰氏阴性菌细胞被脱色,当复染时,脱掉紫色的细胞的细胞壁又着上红色(例如大肠杆菌)。

  四、实验器材:

  1、菌种:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。

  2、溶液和试剂:革兰氏染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、95%乙醇、番红复染液、水。

  3、仪器及其他用品:酒精灯、载玻片、显微镜、接种环、试管架、滤纸、滴管。

  五、实验步骤:

  1、取一个载玻片,将其洗净并沿一个方向擦拭干净,直至液体不再其上收缩为止;将接种环整平,用灼烧过的接种环在混匀的菌种中取菌,按常规方法图片,应涂大,不宜过厚。

  2、打开酒精灯,用火焰固定,不宜烤得太狠,否则菌种呈假阳性。

  3、轻旋结晶紫染液滴管,将其旋出,滴加1滴草酸铵结晶紫染液覆盖涂菌部位(轻晃使其完全覆盖),染色40s。

  4、染色完成后倾去染液,水洗至流出水为无色。

  5、将玻片上残留水用滤纸吸去,待其干燥。

  6、在涂菌部位滴加碘液,覆盖1min。

  7、媒染完成后,倾去碘液,水洗至流出水无色。

  8、将玻片上残留水用滤纸吸去,待其干燥。

  9、将载玻片放在白色笔记本上,用滴管滴加95%乙醇脱色,脱色30~40s,不宜脱色太狠,否则菌种呈假阴性。

  10、脱色完成后立即用水洗去乙醇。

  11、将玻片上残留水用滤纸吸去,待其干燥。

  12、滴加番红复染液,染色4min。

  13、染色完成后,水洗至流出水无色。

  14、吸去残留水并晾干。

  15、用显微镜观察并绘图。

  用以上步骤完成:大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的混合图片染色、大肠杆菌单独菌种染色、金黄色葡萄球菌单独菌种染色。

  六、注意事项:

  1、选用活跃生长期菌种染色,老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。

  2、图片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性。

  3、脱色是革兰氏染色是否成功的关键,脱色不够造成假阳性,脱色过度造成假阴性。

  七、实验结果与讨论:

  1、结果:

  绘出高倍镜下观察的菌体图像。

  2、思考题:

  (1)写出常见的革兰氏阳性菌与阴性菌,包括致病菌。

  (2)革兰氏染色的原理是什么?印象因素有哪些?

  (3)如何验证你的染色结果是否正确?

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